Caracterización de Células Troncales en la Línea Celular Samy de Cáncer Hepatocelular de Rata
El cáncer se caracterizado por una proliferación anormal de células, lo cual es dirigido por una subpoblación denominada células troncales del cáncer (CTC), encargadas de la proliferación y mantenimiento del tumor maligno, y las responsables de la ineficiencia de los tratamientos y la recurrencia. E...
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| Institution: | Universidad EIA |
|---|---|
| Main Authors: | , |
| Format: | Trabajo de grado - Pregrado |
| Language: | Español |
| Published: |
Univeridad de Santander
2018-06-20
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| Edition: | 1 ed. |
| Subjects: | |
| Online Access: | https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/5703 |
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Table of Contents:
- RESUMEN 13 ABSTRACT 14 INTRODUCCIÓN 15 1. Planteamiento del problema 17 1.1 Descripción del problema 17 1.2 Justificación 17 2. Objetivos 18 2.1 General 18 2.2 Específicos 18 3. Referente teórico 19 3.1 Antecedentes 19 3.1.1 El modelo Modificado del Hepatocito Resistente 19 3.1.2 Origen descriptivo de las líneas Samy ECM, Samy SM, Samy TP17 y R48HR1 20.................................................................................20 3.2 Bases teóricas 22 3.2.1 Regeneración fisiológica del hígado 22 3.2.2 Carcinoma hepatocelular (CHC) 22 3.2.3 Células Troncales del Cáncer (CTC) 23 3.2.4 Modelos experimentales que se utilizan en el estudio de CHC 24 3.2.4.1 Modelos experimentales utilizados en el estudio de epatocarcinogénesis..25 3.2.4.2 Modelo del hepatocito resistente 25 3.2.4.3 Modelo de xenoinjerto subcutáneo 26 3.2.4.4 Modelo de xenoinjerto ortotópico 27 3.2.4.5 Modelo de xenoinjerto de células troncales del cáncer de hígado (CTC) 27 4. Sistema de hipótesis 28 4.1 Hipótesis investigativa 28 5. Materiales y métodos 29 5.1 Clasificación de la investigación 29 5.2 Diseño metodológico 29 5.2.1 Condiciones de cultivo de las líneas celulares Samy 29 5.2.2 Citometría de flujo 31 5.2.3 Ensayo de clonogenicidad 32 5.2.4 Ensayo de formación de esferoides 32 5.2.5 Ensayo de tumorigenicidad 33 6. Resultados y discusiones 34 6.1 Origen del grupo de las líneas celulares denominadas Samy 34 6.2 Identificación de los marcadores de células troncales que son expresados en las líneas celulares a través de citometría de flujo 34 6.2.1 Citometría de flujo 34 6.2.1.1 Línea Samy ECM................................................................35 6.2.1.2 Línea Samy SM 37 6.2.1.3 Línea Samy TP17 39 6.2.1.4 Línea Samy 48R1. 42 6.3 Capacidad de la línea celular Samy de proliferar y/o autorrenovarse a través de ensayos in vitro.........46 6.3.1 Ensayo de clonogenicidad..... 46 6.3.2 Ensayo de formación de esferoides....48 6.3.2.1 Línea Samy ECM....48 6.3.2.1 Línea Samy SM.....49 6.3.2.1 Línea SamyTP17 49 6.3.2.1 Línea Samy 48R1. 50 6.4 Capacidad de las líneas celulares Samy ECM y Samy TP16 de formar tumores in vivo a través del ensayo de tumorigenicidad en ratas singénicas y en ratones inmunodeficientes 53 6.4.1 Ensayo de tumorigenicidad con las líneas Samy ECM Y SamyTP17 53 6.4.2 Histología 60 6.4.3 Aislamiento de las células identificadas con los marcadores de células troncales a través de citometría de flujo, determinación de la capacidad de autorrenovarse a través de los ensayos in vitro y de formar tumores en ratones inmunodeficientes. 62 6.4.3.1 Sorting 63 6.4.3.2 Determinación de la capacidad de autorrenovación de las células aisladas. 63 6.4.3.3 Capacidad de las células aisladas CD90+ de formar tumores en ratones inmunodeficientes (NSG) 63 7. Conclusiones 66 8. Recomendaciones 67 9. Referencias… 77 10. Glosario 72 11. Anexos 73
